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細胞培養(yǎng)分類及區(qū)別

原代培養(yǎng) 通過組織塊直接長出單層細胞或用酶或機械方法將組織分散成單個細胞開始培養(yǎng),在**傳代前的培養(yǎng)可認為是原代培養(yǎng)。原代培養(yǎng)**大的優(yōu)點是,組織和細胞剛剛 離體,生物性狀尚未發(fā)生很大變化,在一定程度上能反映體內(nèi)狀態(tài)。特別是在細胞培養(yǎng)會合時,原代培養(yǎng)的某些特殊功能表達尤為強烈。在這樣的培養(yǎng)階段能更好地 顯示與親體組織緊密結(jié)合的形態(tài)學特征。在供體來源充分、生物學條件穩(wěn)定的情況下,采用原代培養(yǎng)做各種實驗,如藥物測試、細胞分化等,效果很好。但應注意, 原代培養(yǎng)組織是由多種細胞成分組成的,比較復雜。即使全為同一類型的細胞,如上皮細胞或成纖維細胞,也仍具有異質(zhì)性,在分析細胞生物學特性時比較困難。其 次,由于供體的個體差異及其他一些原因,細胞群生長效果有時也不一致。 

原代培養(yǎng)也是建立各種細胞系(株)必經(jīng)的階段。假如原代培養(yǎng)能夠維持幾小時甚**更長,即可進行進一步篩選。有的細胞具有繼續(xù)增殖能力,有的細胞類 型只是存活而不增殖,而另外一些細胞只是在特殊條件下應用而不存活,因而細胞類型的分布將會改變。在單層培養(yǎng)的情況下,瓶底全部鋪滿細胞,達到會合以后, 對密度有依賴性的細胞則逐漸減少生長,而失去密度依賴敏感性的細胞則生長增加,天然或自發(fā)轉(zhuǎn)化的細胞則過度生長。借助于頻繁傳代,保持細胞低密度生長,有 利于保存細胞的正常表型(如小鼠成纖維細胞)。而自發(fā)轉(zhuǎn)化則傾向于高細胞密度的過度生長。 

傳代培養(yǎng) 原代培養(yǎng)形成的單層細胞匯合以后,需要進行分離培養(yǎng),否則細胞會因生成空間不足或由于細胞密度過大引起營養(yǎng)枯竭,都將影響細胞的生長,這一程序常稱為傳代 或傳代培養(yǎng)。原代培養(yǎng)在**傳代時即為細胞系,能連續(xù)培養(yǎng)下去的為連續(xù)細胞系;不能連續(xù)培養(yǎng)的為有限細胞系。通常,傳代培養(yǎng)是指擴大培養(yǎng),也就是將一份細 胞一分為二或者一分為三進行培養(yǎng)等。但嚴格說來,不論稀釋與否,將細胞從一個培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移或移植到另一個培養(yǎng)瓶即稱為傳代或傳代培養(yǎng)。可以理解,在任何時 候,細胞從一個瓶子接種到另一個瓶子時總會丟失一部分,因此,在客觀上細胞必定有所稀釋。 

傳代代數(shù)這一概念常常容易同“增殖代數(shù)”相混淆。細胞“一代”一詞僅指從細胞接種到分離再培養(yǎng)時的一段時間。如某一細胞系為第153代,即指該細 胞系已傳代153次。它與細胞“增殖代數(shù)”(細胞世代或倍增)不同,在細胞一代中,細胞約能倍增3~6次。由此可見,細胞代數(shù)與增殖代數(shù)相關,確切的代數(shù) 則依賴于細胞株和培養(yǎng)條件的不同而異。但構成一個細胞系的生長條件必須是同樣的,因而細胞系應該表達近似的增殖代數(shù)或倍增代數(shù)。 


原代培養(yǎng)物經(jīng)**傳代成功后即為細胞系(cell line), 由原先存在于原代培養(yǎng)物中的細胞世系所組成。如果不能繼續(xù)傳代,或傳代次數(shù)有限, 可稱為有限細胞系(finite cell line), 如可以連續(xù)培養(yǎng), 則稱為連續(xù)細胞系(continuous cell line), 培養(yǎng)50代以上并無限培養(yǎng)下去。 

從一個經(jīng)過生物學鑒定的細胞系由單細胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法由單細胞增殖形成的細胞群稱細胞株(cell strain)。所以細胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)或標志的培養(yǎng)細胞。從培養(yǎng)代數(shù)來講,可培養(yǎng)到40-50代。
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